盐地碱蓬甜菜碱合成酶基因的克隆及植物共表达载体的构建
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Q786

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国家自然科学基金;南京农业大学校科研和教改项目


Molecular Cloning of Betaine Synthetase in Suaeda salsa and Construction of Plant Co-expression Vector in a Single Open Reading Frame with the 2A Region of FMDV
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    摘要:

    根据辽宁碱蓬(Suaeda liaotungensis)甜菜碱合成关键酶BADH和CMO序列设计引物,克隆盐地碱蓬的甜菜碱合成酶基因SsBADH和SsCMO,试验发现,SsCMO和辽宁碱蓬CMO(SlCMO)基因核苷酸序列相同;Ss-BADH和辽宁碱蓬BADH(SlBADH)基因核苷酸序列同源性达99%,而编码的氨基酸序列相同.以载体pBlu-script KS( )为基础,分别依次将口蹄疫病毒FMDV的2A序列(60个核苷酸)、SsCMO基因、SsBADH基因连接入多克隆位点,构建载体pBKSC2AB,然后从pBKSC2AB上切下SsCMO-2A-SsBADH融合基因,组装在植物表达载体pCAMBIA S1300的Super promoter下,从而构建成由2A连接甜菜碱合成2个关键酶基因在同一个阅读框(ORF)的植物表达载体.通过农杆菌介导将融合基因转导烟草中,转基因烟草比对照表现出较强的耐盐性.

    Abstract:

    CMO(choline monooxygenase)and BADH(betaine aldehyde dehydrogenase),the two genes encoding the key enzymes of betaine synthesis in Suaeda salsa,were cloned by PCR according to the homologous sequence of which in Suaeda liaotungensis.The nucleotide sequence

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引用本文

王三红,陶建敏,张红梅,等.盐地碱蓬甜菜碱合成酶基因的克隆及植物共表达载体的构建[J].西北植物学报,2007,27(2):

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