摘要:利用RT-PCR和RACE技术,从菠菜中首次获得了14-3-3蛋白基因的全长cDNA序列(GenBank登录号JX952165),命名为So14-3-3。该基因全长1 166 bp,开放阅读框801 bp,编码266个氨基酸。序列比对发现So14-3-3蛋白与其他植物14-3-3蛋白氨基酸序列一致性高达77.6%~84.7%。半定量RT-PCR表明,随NO3-胁迫处理时间的延长和浓度的增加,菠菜根和叶中So14-3-3基因的表达增强。实验构建了pGEX4T-So14-3-3原核表达载体,并通过IPTG诱导后获得分子量约为56 kD的蛋白。进一步的蛋白质印迹检测结果表明,随着NO3-处理时间的延长和浓度的增加,So14-3-3蛋白表达也增加。该实验结果为进一步研究So14-3-3蛋白功能提供了基本的实验基础。