枸杞L-半乳糖酸内酯脱氢酶基因的克隆及表达分析
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青海省科技厅项目(2015-ZJ-735);青海师范大学教学改革研究项目(qhnujy2013106);青藏高原药用动植物资源重点实验室(2014-z-y25)


Cloning and Expression Patterns of GLDH from Lycium barbarum
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    摘要:

    以青海枸杞(Lycium barbarum L.)为模板,采用RT-PCR和RACE技术,克隆枸杞L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(GLDH)基因序列,命名为LbGLDH。LbGLDH基因全长为2 114 bp,包含一个开放读码框1 767 bp(编码588个氨基酸)、5′末端序列57 bp、3′末端序列290 bp。LbGLDH基因核苷酸序列与番茄、马铃薯、烟草GLDH基因具有88%~90%的一致性。LbGLDH编码氨基酸序列包含GLDH蛋白酶具备的FAD-binding-4和ALO结构域。qRT-PCR分析结果显示,在枸杞不同组织中LbGLDH基因的表达、抗坏血酸含量和GLDH活性变化趋势相同,表现为在枸杞的花和果实中表达量最高,成熟叶中表达量最少。推测LbGLDH基因表达促进枸杞果实中抗环血酸含量的积累。

    Abstract:

    A novel L-galactono-1,4-lactone dehydrogenase gene LbGLDH was isolated from Lycium barbarum in Qinghai by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and rapid amplification of cDNA ends (RACE).The full-length cDNA of LbGLDH was 2 114 bp,and contained a complete open reading frame (ORF) of 588 amino acid residues and 5′-end 57 bp and 3′-end 290 bp.Homology analysis indicated that LbGLDH gene sequence was highly 88%-90% to GLDH from Solanum lycopersicum,Solanum tuberosum,Nicotiana tabacum.LbGLDH encoding amino acid sequence contained GLDH protease with FAD-binding-4 and ALO domain structures.Real time-PCR analysis indicated that the expression of LbGLDH gene,ascorbic acid content and GLDH activity were all the strongest in the flower and fruit,and the least in mature-leaf.It was speculated that LbGLDH gene expression could promote accumulation of the ascorbic acid in L.barbarum fruits.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

乔 枫,耿贵工,陈 志.枸杞L-半乳糖酸内酯脱氢酶基因的克隆及表达分析[J].西北植物学报,2015,35(11):2141-2147

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  • 在线发布日期: 2015-12-07
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