烟草花青素苷转运相关基因NtAN9的分离与表达分析
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国家级大学生创新创业训练计划项目(201610564006);


Isolation and Expression Analysis of an Anthocyanin Transportrelated NtAN9 Gene from Nicotiana tabacum
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    摘要:

    为研究花青素苷的转运,利用电子克隆和RTPCR方法,从普通烟草(Nicotiana tabacum)花中分离了1个编码谷胱甘肽转移酶(GST)基因,命名为NtAN9(GenBank登录号KX356542)。NtAN9包含一个690 bp的开放阅读框,编码229个氨基酸残基,属于phi型GST。NtAN9基因组结构由3个外显子和2个内含子组成。多序列比对分析表明,NtAN9与矮牵牛(Petunia hybrida)花青素苷转运相关的GST基因PhAN9具有88%的一致性。系统进化分析显示,NtAN9与花青素苷转运相关的GST基因聚为一支,是PhAN9的直系同源基因。定量PCR分析表明,NtAN9基因在含有花青素苷的四个花发育时期中均有表达,其中在开花前的第Ⅲ期(2 cm <花芽<4 cm)表达丰度达到最高,而在不含花青素苷的根、茎和叶中不表达。由此推测,分离得到的NtAN9可能具有类似PhAN9的功能,与烟草花青素苷的转运与积累相关。NtAN9基因的分离与表达分析,为进一步研究烟草花青素苷的转运奠定了基础。

    Abstract:

    To study anthocyanin transport, we isolated a fulllength gene NtAN9 (GenBank Accession No. KX356542) by in silicon cloning and RTPCR method from Nicotiana tabacum. The NtAN9 contains a 690 bp open reading frame (ORF) encoding 229 amino acid residues, which belongs to a putative phi class glutathione stransferase (GST) family. Its genomic structure contains 3 exons and 2 introns. Multiple sequence alignment showed that NtAN9 has highest identities (88%) with petunia PhAN9 that is an anthocyanin transportrelated GST. Phylogenetic analysis showed that NtAN9 was clustered into an anthocyanin transportrelated GST group, and was an ortholog of PhAN11. The anthocyanin content analysis and realtime quantitation PCR (qRTPCR) showed that NtAN9 was expressed in different flower developmental stages, with highest level in stage Ⅲ, but almost no expression in root, stem and leaf which are almost no anthocyanin. These results suggest that the NtAN9 function is similar with PhAN9 and might be related to the transfer and accumulation of anthocyanin in tobacco plants.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

崔超军,李嘉敏,陈君宇,等.烟草花青素苷转运相关基因NtAN9的分离与表达分析[J].西北植物学报,2016,36(7):1337-1342

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  • 在线发布日期: 2016-08-16
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