胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H~+-ATPase的特性
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S792.11

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中国科学院"百人计划"项目,中国科学院寒区旱区环境与工程研究所创新课题,全国百篇优秀博士学位论文专项基金(199924)项目


Isolation of plasma membrane from Populus euphratica by two-phases partition and properties of its H~+-ATPase
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    以胡杨愈伤组织为材料,用PEG3350/DextranT500构成的两相系统提取质膜微囊,研究质膜H+-AT-Pase的特性。结果显示:由6.3%PEG3350、6.3%DextranT500、KCl、磷酸缓冲液(pH7.8)和蔗糖构成的两相系统提取膜微囊的H+-ATPase活性分别被Na3VO4、KNO3、NaN3抑制了约75%、2.6%和1.3%。方向性检测显示原位膜微囊占提取质膜微囊的90%,翻转膜微囊仅占10%。去垢剂对质膜H+-ATPase活性的影响说明0.015%的TritonX-100和0.01%~0.1%的Brij58适用于测定质膜H+-ATPase活性。Lineweaver-Burk动力学分析该酶的Km值为0.65mmol·L-1,Vmax为37.59μmolPi·mg-1protein·h-1。研究结果表明:两相法提取的质膜微囊主要是正向密闭的膜微囊;胡杨愈伤组织质膜H+-ATPase的最适pH为6.5,最适温度为37℃左右。

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引用本文

杨颖丽,张峰,赵敏桂,等.胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H~+-ATPase的特性[J].西北植物学报,2003,23(11):

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