利用形态学、细胞学、A-PADE和RAPD方法，对5个小麦-中间偃麦草(Thinopyrum intermedium)双体异附加系Line 1、Line 4、Line 10、Line 14和Line 15进行了鉴定。细胞学鉴定结果表明，它们根尖细胞染色体数目为2n=44，花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ(PMCMⅠ)染色体构型为2n=22 Ⅱ，具有高度的细胞学稳定性；形态学鉴定和A-PADE电泳分析证明，Line 1和Line 15可能附加了中间偃麦草第7部分同源群的染色体，Line 10和Line 14可能附加了中间偃麦草第1部分同源群的染色体，Line4则可能同时存在多种染色体变异；RAPD分析表明，在供试的100个随机引物中，有5个引物S21、S29、S57、S121和S152能够在亲本中间偃麦草和双体异附加系中稳定扩增出特异带型，并可作为异附加系所附加染色体的特异RAPD标记。