草木樨状黄芪变异系中甲硫氨酸代谢相关cDNA的分子克隆及其在大肠杆菌中的表达
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Q943.2

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陕西省教育厅重点科研项目 02JS06


Molecular cloning of methionine-metaboly correlated cDNA in Astragalus melilotoides Pall.variant line and its expression in E.coli
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    利用mRNA差异显示技术(differential display)从草木樨状黄芪耐甲硫氨酸变异系中分离到一差异cDNA片段,命名为tm03(360bp)。mRNA杂交结果显示,该片段只在变异苗中表达,初步确定其与甲硫氨酸代谢相关。测序后在Genebank搜寻,未发现有同源序列。进一步分析表明,该cDNA克隆可编码完整的蛋白。在该基因片段两端分别合成含HindⅡ和BamH Ⅰ酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到pRSET A表达载体,转化宿主菌JMl09(DE3),经IPTG诱导表达了N′端含6个组氨酸的蛋白质,分子量约为14kD,为进一步研究该蛋白的结构和生物学功能奠定基础。

    Abstract:

    Differential cDNA fragment which was named tm03 (360 bp) was isolated from Astragalus melilotoides Pall. methionine-tolerant variant line by mRNA differential display analysis.After detected by mRNA dot hybridization,tm03 expressed only in the variant lin

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引用本文

刘永军 景建洲 贾敬芬 李振勇.草木樨状黄芪变异系中甲硫氨酸代谢相关cDNA的分子克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].西北植物学报,2004,24(1):

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